Guanidiinitiosyanaatti 593-84-0 helpottaa nukleotidien ja peptidien uuttamista eläinten sisäelimistä

Guanidiinitiosyanaatti | 593-84-0 | on vahva proteiinidenaturointiaine. Se on valkoinen kiteinen jauhe, ärsyttävä ja herkkä valolle. Se liukenee etanoliin ja veteen, ja sen sulamispiste on 118℃. Guanidiinitiosyanaattia käytetään pääasiassa denaturointiin, solujen hajoaminen ja RNA:n ja DNA:n uuttaminen. Se on yleinen kemiallinen komponentti nukleiinihappojen uuttamisessa.

Patentti cn111500664a esittää menetelmän nukleotidien ja polypeptidien uuttamiseksi eläinten sisäelimistä käyttäen guanidiinitiosyanaattia. Nukleotidit ovat yhdisteitä, jotka koostuvat puriiniemäksestä tai pyrimidiiniemäksestä, riboosista tai deoksiriboosista ja fosforihaposta ja joita käytetään laajalti lääketieteessä, äiti- ja lapsituotteissa, mausteissa ja elintarvikelisäaineissa. Polypeptidi on Î ±- Yhdisteet, jotka muodostuvat peptidisidoksilla toisiinsa yhdistetyistä aminohapoista, ovat proteiinihydrolyysin välituotteita, jotka käsittävät ihmisen hormonien, hermojen, solujen kasvun ja lisääntymisen eri aloja. Niiden merkitys on kehon eri järjestelmien ja solujen fysiologisten toimintojen säätelyssä, asiaankuuluvien entsyymien aktivoimisessa kehossa, aineenvaihduntamembraanin läpäisevyyden edistämisessä tai DNA: n transkription kontrolloimisessa tai tiettyyn proteiinisynteesiin vaikuttamisessa.

Eläinten sisäelimet sisältävät runsaasti nukleotideja ja peptidejä, mutta tällä hetkellä nukleotidien ja peptidien uuttaminen tapahtuu pääosin erikseen, mikä johtaa resurssien tuhlaukseen ja monimutkaisiin prosesseihin. Guanidiinitiosyanaatti auttaa uuttamaan nukleotideja ja peptidejä eläinten sisäelimistä. Erityiset menetelmät ovat seuraavat:

Pese ensin tuoreiden eläinten sisäelimet, valuta ne, hienonna ne, sitten muussaa ne, lisää deionisoitua vettä sekoitettuun liuokseen, lisää sitten sekoitettuun liuokseen guanidiinitiosyanaattiliuos, tärise ja sekoita hyvin ja anna seisoa. Sitten siihen lisätään piidioksidia sisältävää kantajaa, koska guanidiinitiosyanaatti pilkkoo solut ja soluista vapautuvat nukleotidit yhdistetään piidioksidikantajaan. Poista piidioksidia sisältävä kantaja, absorboi ja erota se eluentilla puhdistettujen nukleotidien saamiseksi.

Sitten NaCl -liuos lisätään jäännösliuokseen, josta piidioksidikantaja on otettu pois, seos uutetaan, sitten lisätään komposiittiproteaasia, suoritetaan sitten mikroaalto -entsymaattinen hydrolyysi, entsymaattinen hydrolyysiliuos kuumennetaan vesihauteessa , sentrifugoidaan, supernatantti otetaan ja polypeptidi saadaan kylmäkuivauksen jälkeen.

Tässä menetelmässä hyödynnetään ominaisuuksia, jotka guanidiinitiosyanaatti voi tuhota solurakenteen ja denaturoida proteiinin. Se ei voi ainoastaan ​​poimia nukleotideja ja peptidejä peräkkäin, vaan sillä on myös yksinkertaisen menetelmän ja tehokkuuden edut. Samalla vältetään myös biokemiallisten reagenssien välisen reaktion ongelma, kun lisätään biokemiallisia reagensseja uuttoa varten.