Guanidiinihydrokloridin ja guanidiinitiosyanaatin vaikutukset nukleiinihappouutossa

Nukleiinihappouutolla tarkoitetaan prosessia, jossa nukleiinihapot erotetaan näytteistä fysikaalisilla ja kemiallisilla menetelmillä. Korkealaatuisten nukleiinihappojen eristäminen on keskeinen vaihe molekyylibiologian tutkimuksessa. Guanidiinihydrokloridi ja guanidiinitiosyanaatti voivat denaturoida proteiineja ja niitä käytetään laajalti nukleiinihappouutossa. Tässä artikkelissa esitellään guanidiinihydrokloridin ja guanidiinitiosyanaatin toimintoja nukleiinihappouutossa.

Guanidiinihydrokloridi, CAS-nro: 50-01-1, on valkoinen kiteinen jauhe. Guanidiinihydrokloridi on voimakas nukleaasin estäjä, mutta se ei ole voimakas denaturoiva aine. Sen päärooli nukleiinihappouutossa on denaturoida proteiini ja estää entsyymiaktiivisuutta. Guanidiinihydrokloridi voi nopeasti tuhota solukalvon ja denaturoida ja saostaa proteiinin siten, että nukleiinihappo voi päästä eroon proteiinin takertumisesta.

Guanidiinitiosyanaatti, CAS-numero: 593-84-0, on valkoinen kiteinen jauhe. Guanidiinitiosyanaatti on voimakas proteiinin denaturointiaine ilman RNaasi- ja DNaasiaktiivisuutta. Nukleiinihappouutossa guanidiinitiosyanaatti voi nopeasti rikkoa soluja tai viruksia vapauttaakseen nukleiinihapon, estää solujen vapautuvan nukleaasin ja varmistaa nukleiinihapon primaarisen rakenteen eheyden.

Guanidiinihydrokloridi ja guanidiinitiosyanaatti ovat yleisiä guanidiinisuoloja nukleiinihappouuttolysaateissa. Ne eivät vain pysty tarjoamaan runsaasti suolaa sisältävää ympäristöä, vaan myös inaktivoivat nukleaasia, vapauttavat nukleiinihappoa ja suojaavat nukleiinihappomolekyylejä.